フラッシュ&HPLC自動精製システム C-700 4-5(4-5)

概要

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フラッシュ分取とHPLC分取(実例) 4種ピリジンの分取におけるフラッシュ分取とHPLC分取の違い 天然物からのクルクミンの精製(フラッシュ分取後のHPLCによる追分取) ターゲット成分 *ピリジン…その誘導体は香料・農薬などに使用される。 分析結果 分析手順 分析結果 C-700システム構成 ① 2-methoxy pyrazine ③ 2-ethyl pyrazine ② 2-acetyl pyrazine ④ 2,5-dimethyl pyrazine C-700は単にフラッシュとHPLCの2種類のカラムを使用で きる装置というわけではありません。 分離能はHPLC分取の方がフラッシュ分取に勝りますが、フ ラッシュ分取でもAGO機能を併用することにより分離能の 向上が見られます。 フラッシュ分取では220nmと254nmの2つの波長によって分取。 さらに図1の緑枠の領域をHPLCにて追精製を行いました。ここ にはターゲット成分であるクルクミンのほかに、メトキシクルク ミンが含まれていると推測されます。図2がこのHPLC分取の結 果であり、緑枠で示した部分がクルクミンの精製ピークです。 C-700により、マトリックスが多い天然物からの有効成分の精 製が可能となりました。 充填剤 粒径(μm) カラム長(mm) 内径(mm) 流量 溶媒 濃度勾配 波長 しきい値 サンプル量 フラッシュカラム シリカ80g 40-60 194 31 HPLCカラム シリカ60Å 10 150 30 40ml/分 A: ヘキサン B:酢酸エチル      ① 15%B 1分      ② 15%→100%B 20分      ③ 100%B 1分 254nm 50mAU 0.5g 1.フラッシュ分取 ① ターメリックをジクロロメタンで抽出後、ODSに   吸着させる。 ② 吸着させたODSをプレエルートカラムに充填し、   サンプルループの代わりに C-700に取り付ける  (写真c)(ドライロード)。 ③ eの40gODSカラムにより分取。 ④ 移動相…水/メタノールによる濃度勾配。 ⑤ AGOにより、ピーク出現中はその濃度を維持。 2.HPLC分取 ① 図1の緑枠の範囲をHPLC分取(図2)。 ② カラムはODS。 ③ 移動相・・・水/メタノールによる濃度勾配。  a e c b d HPLC分取 フラッシュ分取(AGO仕様) フラッシュ分取(通常) 図1 フラッシュ分取チャート 移動相中のメタノール濃度 UV波長 254nm UV波長 220nm 図2 HPLC分取チャート 移動相中のメタノール濃度 UV波長 220nm ・
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パックドカラム パックドカラムの種類と仕様 HPLC用 充填済みカラム ハイパフォーマンス・シリカ(充填剤粒径15-40μm) 順相シリカ(充填剤粒径 40-63μm) 逆相シリカ C18(充填剤粒径 40-63μm) 順相シリカ(充填剤粒径 10μm) 逆相シリカ C18(充填剤粒径 10μm) 順相シリカ(充填剤粒径 15μm) 逆相シリカ C18(充填剤粒径 15μm) アミノ(充填剤粒径 40-63μm) ディーオール(充填剤粒径 40-63μm) シアノ(充填剤粒径 40-63μm) SCX-2(充填剤粒径 40-63μm) 品番 11057611 11057612 11057613 11057614 11057615 11057616 品番 11057601 11057602 11057603 11057604 11057605 11057606 11057607 11057608 11057609 11057610 品番 11061171 11061172 11061173 11061174 11061175 11061176 11061177 順相シリカ 60Å 500m2 /g球状 1.5-6.5 ・ ・ 逆相シリカ 60Å 500m2 /g球状 1-7.5 21% エンドキャップあり 細孔径 表面積 pH範囲 炭素化率 その他 品番 11061186 11061187 11061188 11061189 11061190 11061191 11061192 品番 11061178 11061179 11061180 11061181 11061182 11061183 11061184 品番 11061193 11061194 11061195 11061196 11061197 11061198 11061199 品番 11057627 11057628 11057629 11057630 11057631 11057632 11057633 11057634 品番 11057643 11057644 11057645 11057646 11057647 11057648 11057649 11057650 品番 11057635 11057636 11057637 11057638 11057639 11057640 11057641 11057642 品番 11057651 11057652 11057653 11057654 11057655 11057656 11057657 11057658 品番 11057617 11057618 11057619 11057620 11057621 11057622 11057623 11057624 11057625 11057626 内径x長さ(mm)   12.3 x 60.0   21.1 x 77.0   21.0 x 129   26.7 x 127   31.0 x 194   36.1 x 211 内径x長さ(mm)   12.3 x 60.0   21.1 x 77.0   21.0 x 129   26.7 x 127   31.0 x 194   36.1 x 211   60.2 x 141   60.2 x 211   88.5 x 378   115 x 427 内径x長さ(mm) 10.0 x 150 10.0 x 250 21.2 x 150 21.2 x 250 30.0 x 150 30.0 x 250 50.0 x 250 内径x長さ(mm) 10.0 x 150 10.0 x 250 21.2 x 150 21.2 x 250 30.0 x 150 30.0 x 250 50.0 x 250 内径x長さ(mm) 10.0 x 150 10.0 x 250 21.2 x 150 21.2 x 250 30.0 x 150 30.0 x 250 50.0 x 250 内径x長さ(mm) 10.0 x 150 10.0 x 250 21.2 x 150 21.2 x 250 30.0 x 150 30.0 x 250 50.0 x 250 内径x長さ(mm)   12.3 x 60.0   21.1 x 77.0   21.0 x 129   26.7 x 127   31.0 x 194   36.1 x 211   60.2 x 141   60.2 x 211 内径x長さ(mm)   12.3 x 60.0   21.1 x 77.0   21.0 x 129   26.7 x 127   31.0 x 194   36.1 x 211   60.2 x 141   60.2 x 211 内径x長さ(mm)   12.3 x 60.0   21.1 x 77.0   21.0 x 129   26.7 x 127   31.0 x 194   36.1 x 211   60.2 x 141   60.2 x 211 内径x長さ(mm)   12.3 x 60.0   21.1 x 77.0   21.0 x 129   26.7 x 127   31.0 x 194   36.1 x 211   60.2 x 141   60.2 x 211 内径x長さ(mm)   12.3 x 60.0   21.1 x 77.0   21.0 x 129   26.7 x 127   31.0 x 194   36.1 x 211   60.2 x 141   60.2 x 211   88.5 x 378   115 x 427 入数/箱 20 20 15 15 12 10 入数/箱 20 20 15 15 12 10 4 4 2 2 入数/箱 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 2 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 2 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 2 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 2 1 1 1 1 1 1 1 入数/箱 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 ・

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