微量試料の生成・濃縮カラム MonoSpin 12-13(12-13)

概要

  1. アプリケーション
  2. リン酸脂質吸着カラム MonoSpin Phospholipid
  1. 12
  2. 13

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a-POP(m/z274)a-PHPP(m/z260)a-PHP(m/z246)a-PVP(m/z232)a-PBP(m/z218)a-PPP(m/z204)min5101520250500000100000015000002000000ConditionsColumn:InertSustainPhenyl(3μm,150×2.1mmI.D.)Eluent:CH3CN-HCOONH4(10mM,0.1%HCOOH)=25:75(v/v)MonoSpinC18FFを用いた全血サンプルの分析全血0.3mLと300mMリン酸緩衝液(pH10.0)1.2mLを混合する。↓12,000×gで5分間遠心分離後の上清をサンプルとする。サンプル調製1.コンディショニング2.吸着3.洗浄4.溶出精製サンプル①メタノール300μL②300mMリン酸緩衝液(pH10.0)300μL(①→遠心→②の順に操作)サンプル調製した上清1mL300mMリン酸緩衝液(pH10.0)300µLメタノール100μL遠心:1,000×gタンパク質の回収、負荷量の確認InsulinもしくはBSAを0.1%TFA水溶液で各濃度になるように調製する。サンプル調製1.コンディショニング2.吸着3.洗浄4.溶出精製サンプル①アセトニトリル300μL②0.2%TFAinH2O300μL(①→遠心→②の順に操作)サンプル溶液300µL0.2%TFAinH2O300µLC2H5OH/H2O/TFA=60:40:0.1300µL遠心:2,000×gAreaConcentration(mg/mL)負荷量オーバー最大負荷量4mg/mL300μL(サンプル量:1.2mg)回収率90%Insulin負荷量BSA負荷量負荷量オーバー最大負荷量0.1mg/mL(サンプル量:0.03mg)回収率86%AreaConcentration(mg/mL)MonoSpinC18を用いることでタンパク質の回収も簡便に行うことができます。詳細は弊社ホームページ「テクニカルノートLT157」を参照してください。アプリケーション1min1min1min1minFlowRate:0.2mL/minCol.Temp.:40℃Detection:MS(ESI)遠心遠心遠心遠心12再吸着遠心遠心遠心遠心各1min1min1min1min
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MonoSpinPhospholipidは、優れたリン脂質吸着能力を有したスピンカラムです。血清、血漿試料などを2ステップで簡便・確実に処理できます。吸着したリン脂質は、回収用溶液をカラムへ流すことで回収することも可能です。除タンパク法で処理(タンパク質を変性させて遠心し、その上清を使用)トータルイオンクロマトグラム(処理方法の比較)金属酸化物とリン酸化合物の特異的な相互作用によってリン脂質が充填剤に保持されます。MonoSpinPhospholipidで処理90%以上のリン脂質を除去Time(min)Intensity,cpsリン脂質吸着用カラムMonoSpinPhospholipid【特長】簡単な操作で生体試料中のリン脂質を除去できます。90%以上のリン脂質を除去するため、LC/MSにおけるマトリックス効果を低減できます。非常に微量な血清に対して適応することができます。吸着したリン脂質は回収することもできます。吸着原理操作方法1.コンディショニング0.1%ギ酸-アセトニトリル200μL2.吸着サンプル溶液50μL2mLマイクロチューブに0.1%ギ酸-アセトニトリル:血清=4:1を混合↓10,000×gで30秒間遠心後の上清をサンプルとする。脂質除去後のサンプル遠心:3,000×gTiO2ZrO2官能基:二酸化チタン、二酸化ジルコニウムコーティングカートリッジ形状:S型、L型リン脂質長鎖脂肪酸リン酸基グリセロール塩基(極性イオン官能基)疎水性親水性相互作用TiO2ZrO2サンプル調製Monolith関連製品FastRemoverforPhospholipidろ過による除タンパク処理ができ、リン脂質を除去する機能を持つ96ウェルフィルタープレート製品も用意しています。詳細はお問い合わせください。*吸着したリン脂質はアンモニア-メタノール溶液により回収することが可能です。30sec30sec遠心遠心13

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